简介
PCR 检测是什么?
PCR ,是「聚合酶链式反应」的缩写。PCR核酸检测,是一种快速而准确地扩增已知的特定基因(即「目的基因」)进而分析结果的检验技术,被广泛应用于临床的诊断与评估中。
这项技术可以把单个 DNA 扩增上百万倍,就像能放大声音的「扩音器」。本来 DNA 片段(基因)难以被检测出来,通过这一「扩音器」得以被检测到。
此外,通过扩音器「放大后」的声音大小,可以了解「扩音器」放大前的声音大小,即原样本中目的基因的数量。
PCR 检测技术相对廉价、准确性高,并且只需要相对简单的条件与设备即可完成,但只能针对已知的特定基因(即「目的基因」)有没有、有多少。比如,要检测某个 DNA 片段(基因)是否存在、定量测定某个 DNA 片段的含量等。
适应证
PCR什么情况下需要做?
总的来说,当临床上需要了解某个已知的特定 DNA 片段是否存在、存在的量多少时,会考虑进行 PCR 检测。总的来说,有以下几类:
1. 肿瘤的评估:
恶性肿瘤细胞与正常细胞长得不一样,可能存在一个或若干个潜在的基因突变。相应的靶向药物可以针对这些基因突变起到抗肿瘤的作用。
因此,在恶性肿瘤中,PCR检测可以了解这些基因是否发生突变,进而预测某种靶向药物对患者是否有效。
这里还需要特别指出下面两种情况:
- 慢性髓系白血病在诊断时和开始治疗后,需要采血样通过PCR技术监测疗效。
- 鼻咽癌与 EB 病毒关系密切,需要在治疗前通过PCR定量检测血浆中的 EB 病毒 DNA 水平进行诊断与分期。
2. 遗传病评估
一些临床疾病通过检测一个或少数的若干个基因即可诊断,如地中海贫血。这时候,通过 PCR 检测可以有效而准确地进行诊断、分型。对于一些可能存在遗传性肿瘤综合征的情况,如对于有家族性乳腺癌风险的人群,可以对相关基因位点进行 PCR 检测以明确风险。
这里需要特别指出的是:
遗传病无法治愈。 孕妇的血液中存在胎儿的 DNA ,因此可以从特定遗传病的高风险孕妇的血液中分离胎儿 DNA 进行检测,以降低有关遗传疾病的风险。
3. 感染性疾病诊断与评估
PCR 检测可以快速、高效、即时地检测样本中是否存在特定病原体的核酸序列,从而检验是否存在该病原体的感染。例如, PCR 检测目前广泛用于人类免疫缺陷病毒( HIV )的早期感染检测。
通过 PCR 检测,对于一些常见导致感染的病原体,可以在 4~8 小时内明确具体是哪一种病原体导致的感染,相对传统的病原体培养技术(往往需要 2~3 天)要更加高效。
但这里也要指出, PCR 检测在病原体的检验上也存在显著的局限性,无法取代传统的病原体培养技术。
此外,对于已知的慢性病毒感染,例如乙肝病毒感染、人乳头瘤病毒( HPV )感染, PCR 检测可以了解病毒 DNA 的含量,以评估目前感染的情况。
注意,这里和NGS测序不一样, PCR 只能设定一个或少数几个病原体为「目标」去检测。
这里需要特别指出的是,新冠疫情期间,我国存在大面积的核酸检测普筛,这里的核酸检测即是通过 PCR 技术,可以识别人群中存在的感染者。
还可以对环境样品进行 PCR 检测,以明确病原体对环境的污染情况。
4. 验证NGS测序结果
PCR 检测就像文档中的「查找」工具,必须要有一个已知的 DNA 片段作为「目标」,然后去检测「有没有」、「有多少」。而在并不知道这个「目标」在哪里的时候,就需要通过NGS测序去寻找。对于NGS测序得出的结果,如果需要验证,可以通过 PCR 技术。
禁忌证
暂无。
注意事项
PCR 检测前要做什么准备工作吗?
临床诊疗中, PCR 检测前,患者方需要充分地知情同意,包括价格、必要性和隐私保护事项。同时,要注意保存好有关医疗文书。
如果是通过手术或有创活检获取 PCR 检测所需要的组织标本,那么需要遵循手术或有创活检的有关注意事项,包括禁食时间、饮食内容、运动和用药。
如果正在服药,那么需要咨询医生是否需要停药,并严格遵守。
在社区新冠筛查中,进行 PCR 检测前,需要做到:
- 携带个人有效证件;
- 采样前 2 小时建议最好不吃东西,防止采样中出现呕吐导致误吸,但是如果确实饿了也不是不能吃;
- 采样前 30 分钟不吸烟、喝酒、咀嚼口香糖;
- 排队时与他人保持 1 米距离,不扎堆交谈;
- 从出门开始佩戴口罩,检测时取下,检测后立即戴好。
PCR 检测是通过什么方式进行的?要不要抽血?
PCR 检测使用相应的样本进行。
样本包括:鼻咽拭子、咽拭子、鼻咽抽取物或呼吸道抽取物、痰液、支气管或肺泡灌洗液、粪便、肛拭子、血液和血清、脑脊液、腹水、胸水、肿瘤组织等。
采样人员在获取标本后,会将标本经妥善处理后进行检测。如果需要采集血液样本,就需要抽血了。
对于新冠疫情期间的社区新冠筛查核酸检测,采取鼻咽拭子或咽拭子进行检测。
-
鼻咽拭子: 采样人员会一手轻扶被检测者的头部,一手执拭子贴鼻孔轻轻进入,待拭子顶端到达鼻咽腔后壁时,轻轻旋转一周,然后缓缓取出拭子,将拭子头浸入含 2~3 ml 病毒保存液的管中,尾部弃去,旋紧管盖。
-
咽拭子: 被检测者需要先用生理盐水漱口,采样人员会将拭子先用无菌生理盐水湿润。之后,被检测者需要头部微仰,嘴张大,并发「啊」音。
这时采样人员会将拭子越过舌根,在被检测者的两侧扁桃体稍微用力来回擦拭至少3次,然后再在咽后壁上下擦拭至少 3 次,将拭子头浸入含 2~3 ml 病毒保存液的管中,尾部弃去,旋紧管盖。
做完 PCR 检测后,需要注意什么?
无特别注意事项,具体取决于获取标本的途径,获取标本后需要严格遵守医嘱。
对于新冠疫情期间的社区新冠筛查核酸检测,如果是鼻咽拭子采集,可能出现少量鼻腔出血,一般不需要特殊处理,如出血量较多请及时到医院进行处理。
并发症
暂无。
结果解读
做 PCR 检测多久出结果?
一般在采样的 24~72 小时内出结果。
对于产前诊断,可能需要更多时间。
对于新冠疫情期间的社区新冠筛查核酸检测,6 小时即可出结果,有阳性结果有关部门会迅速进行通知。PCR 检测准确性如何?
取决于送检样品质量是否符合标准。
如果符合标准、检测过程按照操作规程进行,那么 PCR 检测本身具备很高的准确性。
PCR 检测报告中一些常见的结果如何解读?
PCR 检测检测的是某个 DNA 片段「有没有」、「有多少」。这个 DNA 被称为「目的 DNA 」。
如果结果为阴性,代表样本中没有检测出该目的 DNA 片段的存在。
如果结果为阳性,那么后面可能会给出「有多少」的数值,即该目的 DNA 的含量,单位是「IU/ml」或「拷贝/ml」。数值越大,每毫升样品中该目的 DNA 的含量越高。具体的数据需要专业人士进行分析,对于普通患者,只需要关注结论即可。
更多信息
PCR 检测大概需要多少钱?
影响价格的主要是 PCR 检测类型、样本处理的难度和具体检测的 DNA 片段是否常见。
- 对于常见慢性病毒感染,如乙肝病毒、丙肝病毒、人乳头瘤病毒(HPV)、EB病毒等的 PCR 检测,价格在百元到数百元的范围内;
- 对于恶性肿瘤和遗传病检测中的 PCR 产品,单基因约 2000 元,10 个基因约 6000 元。如果做更多的基因数量,就不如进行 NGS 检测划算了。
- 一些罕见病与罕见的感染性疾病,由于具体检测的 DNA 片段并不常见,需要重新设计检验所需的耗材,单个基因的价格可能较高。
- 自费进行一次新冠病毒核酸检测,价格各地不同,约 50~200 元。
- 新冠疫情期间的社区新冠筛查中, PCR 核酸检测是免费的。
面对 PCR 检测结果 ,需要注意什么?
- 对 PCR 检测结果的解读应听从专业人士的意见。
- 注意保护自身医疗隐私。
PCR 检测哪里可以做?
- 对于门诊和住院患者, PCR 检测由医生安排,在院内进行取样。
- 肿瘤、遗传病以及产前诊断的 PCR 检测,在取样后,可能会由医生送院外检验机构进行检测。
- 自行进行新冠病毒核酸检测需要到有开展该项目的正规医院或检验机构进行。
- 新冠疫情期间的社区新冠筛查中, PCR 核酸检测地点听从社区的组织。
PCR 对比起其他基因检测方式,有什么不同?
目前,临床上进行的核酸检测方式主要为 PCR 与各种形式的基因测序,基因测序中又以 NGS 测序为多见。
PCR 检测技术相对基因测序而言,如果仅检测已知的单个或少数几个目的 DNA 片段有没有、有多少,要更加廉价,并且只需要相对简单的条件与设备即可完成。
但是,如果不知道要查的具体 DNA 片段是什么(比如新冠疫情刚开始的时候,人类对新冠病毒还没有任何了解)的时候, PCR 检测是无法胜任的。
而当需要检测数量较多的 DNA 片段(10个左右或更多)的时候,测序技术往往相对 PCR 检测要廉价。
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发布时间 2021年09月01日
最后修订时间 2023年08月18日
· 用于肿瘤、遗传病和感染病的评估和诊断。
· 新冠时常用鼻咽拭子和咽拭子来检测。